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實時熒光定量PCR技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入相應(yīng)的熒光染料或熒光標記探針,在PCR反應(yīng)過程中通過熒光信號變化,對整個PCR進程進行實時檢測,以熒光化學(xué)物質(zhì)監(jiān)測每次聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,通過內(nèi)參或外參的方法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。
實時熒光定量PCR系統(tǒng)簡介
實時熒光定量PCR系統(tǒng)主要用于運行實時熒光定量PCR實驗,通過熒光激發(fā)和采集的方式,對實驗過程進行實時監(jiān)控,將實驗過程數(shù)據(jù)繪制成熒光曲線,實時呈現(xiàn)于儀器顯示界面,并對實驗數(shù)據(jù)進行擬合和分析,最后可生成PDF格式的實驗報告。
對取于其他動物體內(nèi)的生物樣本(如血液,體液等)中包含的目標核酸,進行快速精準的定性和定量分析,同時也能夠?qū)μ厥鈽颖具M行標準曲線,熔解曲線,基因分型等分析。
基本原理
實時熒光定量PCR儀器的原理:聚合酶鏈式反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA擴增,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個溫度循環(huán)周期,使目的基因得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點,是基因擴增技術(shù)的一次重大革新。PCR技術(shù)可將極微量的目標DNA特異地擴增上百萬倍,從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力。
實時熒光定量PCR系統(tǒng)應(yīng)用領(lǐng)域
◆食源性致病菌檢測
◆動植物源性檢測
◆植物科學(xué)與農(nóng)業(yè)生物技術(shù)
◆基因突變及多態(tài)性
◆基礎(chǔ)科學(xué)研究
◆水體監(jiān)測
◆病原核酸檢測
◆ 轉(zhuǎn)基因檢測
◆動物疫情監(jiān)測
◆食品衛(wèi)生檢疫
◆海關(guān)進出口檢疫
儀器基本結(jié)構(gòu)
實時熒光定量PCR系統(tǒng)是實時檢測反應(yīng)的儀器,主要由基因擴增熱循環(huán)系統(tǒng)、熒光實時檢測系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計算機及應(yīng)用軟件組成。其中兩個核心功能模塊:熱循環(huán)系統(tǒng)和熒光實時檢測系統(tǒng)。其中基因擴增熱循環(huán)系統(tǒng)工作原理與傳統(tǒng)基因擴增儀工作原理基本相同,采用半導(dǎo)體加熱制冷工作方式完成熱循環(huán)過程。熒光檢測系統(tǒng)主要有由熒光激發(fā)部件、光信號傳輸部件、熒光檢測部件、控制系統(tǒng)組成。
儀器特點:
1、體積小,重量輕,方便攜帶,兼容0.2PCR單管、八聯(lián)管;
2、采用美國MARLOW定制型帕爾貼模塊高級別半導(dǎo)體芯片,新一代半導(dǎo)體升降溫技術(shù),最快變溫速率可達每秒7度,使用壽命可達一百萬次循環(huán);
3、采用的采光檢測處理技術(shù),自動調(diào)節(jié)熒光本底,提高熒光信號靈敏度和信噪比,獲得更佳結(jié)果;
4、13S四通道快速采光,熒光采集信號穩(wěn)定,減少延時誤差;
5、采用免維護的長壽命LED光源,無需更換,獨立熒光通道,不同通道之間的串擾更?。?/p>
6、 恒流式控制電路,功率輸出平滑,延長 Peltier壽命,提高控溫精度;
7、具有過流、過溫、掉電數(shù)據(jù)自恢復(fù)等保護功能;
8、強大的軟件分析功能,可以進行定量分析,熔解曲線分析,基因分型等,分析軟件免費升級,支持不同行業(yè)的軟件定制;
9、支持恒溫、熒光定量雙模式,適配市面上所有的恒溫PCR試劑盒和熒光定量PCR試劑盒;
10、自帶10寸彩色觸摸屏控制,也可以連接電腦控制。